该指南旨在帮助申请人证实所提出的治疗性蛋白产品（下文中提出的产品）是参比制剂的生物仿制品，根据《公共健康服务法》（PHS Act）第 351（k）节提交上市申请。

　　本指南是 FDA 正在制定的一系列指南之一，用于实施 BPCI 法案。这些指南解决许多问题，包括：

　　●证实参比制剂的治疗性蛋白产品生物类似性的质量信息；

　　●证实参比制剂生物类似性的科学信息 ；

　　●生物仿制品 ：关于 2009 年实施的生物制品价格竞争和创新法案的疑问和解答 ；

　　● FDA 和生物仿制品发起人或申请人之间的正式会议 ；

　　●支持产品和参比制剂之间生物类似性的临床药理学数据。

　　适当时，该指南包括这些指南中的参考信息。

　　该指南给出了 FDA 确定生物类似性方法的概述，并讨论证实其生物类似性重要的科学信息，包括 ：

　　●逐步证实生物类似性的方法，可以包括拟议产品和参比制剂关于结构、作用、动物毒理学、人体药效学（PK）和药代动力学（PD）、临床免疫原性、临床安全性和有效性的比较 ；

　　● FDA 将使用证据总和方法审查生物仿制品的申请，与当局评估科学证据的长期方法一致 ；

　　●比较性结构分析、功能试验、动物测试、人体 PK 和 PD 研究、临床免疫原性评估和比较性临床研究（包括临床研究设计问题）的一般科学原则。

　　讨论的其他话题包括 ：

　　●设计生物仿制品开发项目时，治疗性蛋白产品复杂性的信息，包括生产过程信息的思考 ；

　　●使用来源于研究的数据，比较非美国获批的产品和拟议产品 ；

　　●上市后安全性监测信息。

　　该指南适用于根据《公共健康服务法》（PHS Act）第 351（k）部分提交的申请。然而，本指南中描述的一些科学原理对于《联邦食品药品和化妆品法案》（the FD&C Act）第 505（b）（2）部分下开发的某些生物制品是有益的。《联邦食品药品和化妆品法案》（the FD&C Act）第 505（b）（2）部分和《公共健康服务法》（PHS Act）第 351（k）部分是两种单独的法定计划。该指南的目的不是描述这些计划下批准的标准之间的任何联系。

蛋白质产品的复杂性

　　当设计一个项目来证实生物类似性时，申请人应考虑蛋白质产品的复杂性和相关的科学问题。

　　蛋白质产品的性质和相关科学信息

　　小分子药物，结构通常能够被完整的定义和复制，但蛋白质较为复杂，并且不能与参比制剂的结构同一化。蛋白质结构中会产生许多潜在的差异。由于次要的结构化差异（包括糖基化模式的某些变化）可以显著影响蛋白质的安全性和 / 或有效性，所以评估这些差异很重要。

　　通常，蛋白质至少在三个方面有不同 ：①主要的氨基酸序列 ；②氨基酸的改变，比如糖环（糖基化）或其他侧链 ；③高阶次序结构（蛋白质折叠和蛋白质之间的作用）。氨基酸的变化可能导致多相性并且难以控制。通过配方和环境条件影响蛋白质变化和高阶次序结构，包括灯光、温度、湿度、包装材料、容器封闭系统和传送设备材料。此外，过程和产品相关的杂质可能增加蛋白质产品免疫应答的可能性和 / 或严重性，某些赋形剂可能会限制蛋白质产品的能力。

　　分析科学的改进，能够普遍描述一些蛋白质产品的物理化学和生物学特性，比如高阶次序结构和功能特性。这些分析方法显著提高了确定和描述蛋白质产品的原料和赋形剂以及产品生产过程相关杂质的能力。

　　尽管分析技术有显著改进，然而，当前的分析方法学并不能检测所有相关结构，以及两种蛋白质产品之间的功能差异。此外，对于产品的结构属性和临床效能之间的关系可能也不完全理解。因此，如 PHS 法案中提出，要求有分析性研究、动物研究和临床研究的数据来证实生物类似性，除非 FDA 确定该数据是不必要的。

　　生产过程注意事项

　　不同的生产过程可能在某方面改变蛋白质产品，影响产品的安全性或有效性。例如，用于生产蛋白质产品的生物系统的差异可能造成不同的翻译后修改，这反过来影响产品的安全性或有效性。因此，当已上市的蛋白质产品的生产过程改变，申请持有者必须评估这些变化的影响，并通过适当的分析性检测、功能试验和 / 或在某些动物和 / 或临床研究中证实，质量、纯度或效能的变化对产品的安全性或有效性产生影响。国际协调会议（ICH）的行业指南《Q5E 生物技术 / 生物制品的可比性服从于生产过程的变化》（ICH Q5E）描述了生产变化可比性评估的科学原理。

　　证实生物产品与参比制剂生物类似，比同个制造商评估生产过程变化前后产品复杂性更加复杂。这是因为改变生产过程的制造商对于产品和现有的过程有广博的知识和信息，包括确定的控制装置和可接受的参数。相比之下，生物产品的制造商可能有不同的生产参比制剂的过程（例如，不同的细胞系、原材料、器械、工艺、工艺控制和可接受的标准），并且对参比制剂的生产过程没有直接认知。因此，ICH Q5E 中描述的某些科学原理将需要确立生物类似性，需要确定申请人生产产品和生产过程变化后的产品具有可比性。

美国许可的参比制剂和其他比较方法

　　根据《公共健康服务法》（PHS Act）法案第 351（k）节，为获得许可的拟议产品，申请人必须证明所提出的产品与先前 FDA 已获批的单一参比制剂是生物相似的。申请人通常需要提供证实生物类似性的信息，依据直接比较拟议产品和参比制剂的数据。作为一个科学的问题，需要分析性研究和至少一个临床 PK 研究，如果适当的话还要有至少一个 PD 研究，旨在支持生物类似性，PHS 法案第 351（k）部分的目的必须包括拟议生物仿制品和非美国许可的参比制剂之间的比较充分，除非可以科学地证明不需要进行研究。在某种程度上，根据 PHS 法案第 351（k）（2）（A）部分的要求解决。在这样的情况下，申请人应当提供充分的数据或信息，以科学地判断这些经许可的参比制剂的相关性。鼓励申请人在开发项目期间与 FDA 讨论他们的计划，以提供对美国许可的参比制剂的充分科学判断。FDA 将在审查 351（k）申请期间作出这些理由是否充分的最终决定。

发展和评估证实生物类似性的方法

　　FDA 建议申请人使用逐步的方法证明生物类似性。FDA 考虑评估申请人提供证据的完整性，与当局长期评估科学证据一致。

　　使用逐步的方法证实生物类似性

　　生物仿制药开发项目的是支持拟议产品和参比制剂之间的生物类似性，包括评估产品之间观察到的差异的影响，而不是独立地建立拟议产品的安全性和有效性。FDA 建议申请人使用逐步的方法开发支持生物类似性所需的数据和信息。在每个过程中，申请人应当评估与拟议产品生物类似性相关的其余因素的不确定性，并在下个步骤尝试解决不确定性。可能的情况下，进行的研究应设计为使其最大化表现出生物相似性。例如，临床免疫原性研究也可以提供其他关于拟议产品安全性的有用信息。

　　逐步的方法应从广泛的结构化和功能化特征开始比较拟议产品和参比制剂，作为生物仿制药开发项目的基础。更全面和强有力的比较性结构和功能特征——这些研究能够（定性地或定量地）识别拟议产品和参比制剂之间相关产品差异的程度（包括原料药、赋形剂和杂质）——这些特征更有助于确定需要的额外研究。例如，表明拟议产品和参比制剂之间次要差异或没有差异的严密结构和功能比较，将加强动物和 / 或临床检测选择性和目标方法的科学判断，以支持证实生物类似性。这可能有助于进一步量化两种产品之间的类似性或差异，使用有意义的指纹状分析算法，包括大量额外的产品属性及其使用正交试验法结合的高灵敏度。这样的策略可以进一步降低产品之间未检测到的结构差异的可能性，并使动物和 / 或临床检测方法更具选择性和针对性。对原料药作用机制的充分理解，任何观察到的结构差异的临床关联，参比制剂的临床认知，以及表明低安全性风险的等级，相关 PD 测量的有效性可以为动物和 / 或临床研究方法的选择提供进一步的科学判断。

　　申请人应当考虑动物数据在评估毒理学中的作用，在某些情况下，提供证实生物类似性的额外数据将有助于免疫原性的选择。申请人应当进行比较性的人体 PK 和 PD 研究（如果有相关的 PD 测量），并比较适当的研究人群中两种产品的临床免疫原性。如果在进行结构化分析、功能性试验、动物测试、人体 PK和 PD 研究和临床免疫原性评估之后有其余关于生物类似性的不确定性，申请人应当充分考虑解决不确定性所需的额外临床数据。FDA 鼓励申请人在完成比较性结构和功能分析后（结束临床项目之前），在整个发展过程中与当局广泛合作。

　　FDA 认为可以同时完成上述一些调查 ；然而，当局建议申请人使用逐步的方法更好地解决每一步后残留的有关生物类似性的不可能性，包含 FDA 审查在某些时候收集的数据和信息提供的建议。

　　使用总体证据方法评估生物类似性

　　在评估申请人的生物类似性证明时，FDA 将审查申请中提交的数据和信息的完整性，包括结构和功能特征、非临床评估、人体PK 和 PD 数据、临床免疫原性数据和比较性临床研究数据。FDA将使用基于风险的方法评估提交的所有可用的数据和信息，确保拟议产品的生物类似性。

　　因此，即使有配方或次要的结构化差异，申请人也可以证实生物类似性。申请人提供充足数据和信息证实差异在临床上没有意义，拟议产品符合生物类似性的监管标准。例如，如果申请人提供的数据和信息表明，尽管临床非活性成分有次要差异，拟议产品与参比制剂高度相似，产品之间安全性、纯度和效能方面没有临床意义上的差异，某些翻译后修改或某些赋形剂的差异（例如，人体血清白蛋白）也许不能影响生物类似性。临床意义上的差异可以包含拟议产品和参比制剂安全性、纯度或效能在预期范围内的差异。

　　相比之下，两种产品之间发生某些不良事件的概率有微小差异，通常不被视为临床意义上的差异。

证实生物类似性

　　本部分用逐步的方法讨论了开展证明生物类似性所需的数据和信息。为了确定生物类似性，申请人必须提供充足的数据和信息，表明拟议产品和参比制剂高度相似，临床非活性成分中有次要差异，并且两种产品的安全性、纯度和效能方面没有临床意义上的差异。基于特定产品特异性，分析和检测的类型和数量将足以证实生物类似性。

　　结构化分析

　　PHS 法案第 351（k）节申请包括证实生物类似性的信息，除此之外，来源于分析性研究的数据证实生物制品与参比制剂高度相似，尽管临床非活性成分有次要差异，除非 FDA 确定 351（k）申请中不需要某种元素。FDA 首先期望，申请人将用最新的技术广泛描述拟议产品和参比制剂，因为产品的广泛描述是生物类似性证明的基础。拟议产品的表达载体预期将编码相同的初级氨基酸序列作为其参照物。然而，应当由申请人解释次要的变化，比如切断 N 或 C 端的不会改变产品性能。此外，申请人应当考虑蛋白质产品的所有相关特征（例如，一级、二级、三级和四级结构；翻译后修改；生物活性），来证实拟议产品与参比制剂高度相似，尽管临床上非活性成分有次要差异。结构和功能特征比较，动物和 / 或临床检测的选择性和针对性方法的科学判断更强有力。

　　申请人应使用对蛋白结构特征有足够的灵敏度和特异性的分析方法。一般情况下，这些检测包括拟议产品和参比制剂的比较：

　　●一级结构，例如氨基酸序列；

　　●高级结构，包括二级、三级和四级结构（包括聚合）；

　　●酶转录后修饰 ， 例如糖基化和磷酸化；

　　●其他潜在变异体，例如蛋白脱酰胺和氧化；

　　●定向化学修饰，例如聚乙二醇化位点和特征。

　　申请人应对拟议的产品和参比制剂进行广泛的结构表征，了解两种产品在制造过程中的批次间变化性。用于分析的批次都应该用于支持研究中的临床材料生物类似性，旨在证明拟上市的产品与参比制剂具有生物类似性。生产过程中批次的特征也有助于拟议产品的开发。申请人应合理选择代表性批次，包括批次的数目。

　　此外，FDA 建议申请人分析多批拟议产品和参比制剂的最终剂型，评估赋形剂和任何影响纯度的配方产物和工艺过程相关的杂质以及稳定性。拟议产品和参比制剂配方之间的差异是可能影响后续的动物或临床试验的程度和性质的因素。申请人在完成初始分析相似性评估或完成临床试验后考虑生产变化，支持 351（k）的申请，应完成新过程制造批次的分析类似性评估，并通过旧的和新的生产过程建立拟议产品和参比制剂的相似性。变化的性质和程度可以确定分析相似性和可比性研究，以及任何必要的附加研究的程度。

　　如果参比制剂或拟议产品不能用国家最先进技术充分描述其特征，拟议产品的申请不适用于 PHS 法案第 351（k）部分下的申请；申请人应向咨询 FDA 适当的提交途径。

　　功能性试验

　　蛋白质产品的药理学活性应通过体内和 / 或体外功能性试验进行评估。体外试验可以包括但不局限于生物试验、结合试验和酶动力学。体内试验可能包括疾病动物模型的试验（例如，表现出疾病状态或症状的模型），以评估药效学或效能测量的功能性影响。功能性评估是比较拟议产品和参比制剂，也是证明生物类似性的重要方法，可用于科学证明对动物和 / 或临床检测的选择性和靶向性。

　　申请人可以使用功能性试验提供生物活性的额外证据，也就是拟议产品的效能与参比制剂高度相似，证明拟议产品和参比制剂在临床意义上没有差异的结论。这些试验也可以用于提供额外证据，证明两种产品的 MOA 与参比制剂的 MOA 程度相同。功能性试验可以用于支持结构分析，调查观察到的结构化差异，并探索结构活性关系。这些试验预期是可以比较的，这样可以提供相似性证据或显示拟议产品与参比制剂相比在性能上的差异，特别是由结构变化引起的差异使用当前的分析方法不能检测的。当向 FDA 提交的结果时，FDA 也建议申请者讨论试验的局限性。这些讨论有助于评估分析数据，并可指导是否需要进行额外的分析测试以证明生物类似性。

　　功能性试验也可以提供动物和临床数据的信息，评估拟议产品和参比制剂之间结构次要差异的潜在临床影响。例如，基于细胞的生物活性试验可以用于检测体内引起的细胞激素释放症候群。关于这些试验的有效信息，包括敏感性、特异性和验证程度，可以确立影响生物类似性所需的额外动物或临床数据的数量和类型。

　　动物数据

　　PHS 法案第 351（k）条要求申请包括证实生物类似性的信息，依据来自于动物研究的数据（包括毒理学评估），除非 FDA 确定这样的研究在 351（k）申请中是不必要的。动物研究的结果可以用于拟议产品的安全性评估，更普遍地证明拟议产品和参比制剂之间生物类似性。

　　动物毒理学研究

　　作为一个科学问题，依据广泛的结构和功能特征的结果，动物毒理学数据被视为是有用的。拟议产品安全性的不确定性需要在人体临床研究开始之前解决（假设动物研究的结果可以解决不确定性）。

　　任何动物毒理学研究的范围和程度将取决于参比制剂的信息和拟议产品的信息以及两种产品之间已知相似性或差异的程度。FDA 鼓励申请人尽早与当局讨论有关生物仿制药开发计划，包括在没有做动物实验的情况下或做了动物实验的情况下实验的范围和程度的科学判断。

　　如果拟议产品的比较性结构和功能数据提供强力证明与参比制剂的分析相似性，限制动物毒理学数据就足以证明拟议产品的临床用途。这样的研究可以是无牺牲的，包括测量寿命参数、PD 和PK 的终点（评估免疫原性）。

　　如果结构性和功能性数据有范围限制，而且对拟议产品质量的有顾虑，一般的毒理学研究可能需要包括完整的动物病理学、组织病理学、PD、PK 和免疫原性评估。实施动物毒理学研究，将有助于完成拟议产品和参比制剂的比较性研究（即比较性的桥接毒理学研究）。这些剂量、方案、持续时间和测试物种的选择研究应提供两种产品之间有意义的毒理学比较。当解释比较拟议产品和参比制剂的结果时，重要的是理解这些动物试验的局限性（例如，小样本规模、种内差异）。有关生物制品动物毒理学研究设计的详细讨论，参照 ICH 行业指南 S6（R1）《生物技术药物的临床前安全性评估》（（ICH S6（R1））。

　　如果拟议产品的临床数据（例如，来自于美国以外的研究或销售经验）可用（具有相同的给药途径和剂型），通常不会期望从动物毒理学研究获得安全性数据，因为它能为安全使用提供充分证据，除非动物毒理学研究用于解决特定产品的质量问题。

　　如果没有动物种类可以提供产品的药效学相关数据（即没有种类模拟人体反应的产品生物活性），动物毒理学研究通常是没有用的。有关证实种族相关性的详细讨论，参照 ICH S6（R1）描述的标准。然而，之前没有在人类受试者中检测的拟议产品，当药效学无反应的种类（包括啮齿类）的动物数据可能有助于支持拟议产品的临床研究，例如，比较性 PK 和全身的耐受性研究。如果动物毒理学研究不是基于可接受的科学判断，应鼓励额外比较性的体外检测（在适当时，使用人体细胞或组织）。来源于人体细胞的数据可以提供拟议产品和参比制剂之间关于潜在的临床效果重要的比较性信息，尤其是在没有动物可以用来做安全性检测的情况下。

　　一般而言，非临床安全药理学、生殖和发育毒性和致癌性研究并不能保证拟议产品和参比制剂已经通过广泛是高度相似的结构和功能表征和动物毒性研究（如果这样的研究进行）。

　　动物 PK 和 PD 测试的内容

　　在某些情况下，使用 PK 和 PD 测量比较拟议产品和参比制剂的单剂量动物研究是支持生物类似性的完整证据。尤其是申请人可以使用动物研究的结果依据拟议产品和参比制剂的 PK 和 PD 特征证明相似性程度。PK 和 PD 测量也可以被纳入单独的动物毒理学研究。动物 PK 和 PD 评估和人体 PK 和 PD 研究都需要做。

　　解释动物免疫原性结果

　　动物免疫原性评估有助于解释动物研究的结果，通常不会预测人体蛋白质产品潜在的免疫应答。然而，当拟议产品和参比制剂之间生产的差异（如杂质或赋形剂）可能导致免疫原性差异，人体反治疗蛋白质抗体应答的测量可以提供有用的信息。此外，动物免疫原性评估中观察到的差异可以反映两种产品之间潜在的结构性或功能性差异，不能通过其他分析性方法获得。

　　临床研究——总则

　　申请人提交给 FDA 的文件必须包括证实“生物制品和参比制剂在产品的安全性、纯度和效能方面没有临床意义上的差异”。

　　临床研究的性质和范围将取决于实施结构和功能研究后其余不确定性的本质和程度。参比制剂安全性风险，其他安全性和有效性信息（例如，药效学影响和有效性之间的较小联系）的严重程度和频率，可能也会影响临床项目的设计。申请人应提供临床项目的范围和临床研究的类型（即比较性人体 PK 和 PD、临床免疫原性或临床安全性和有效性）的科学证明。

　　作为一个科学问题，FDA 希望申请人实施人体 PK 和 PD 的比较研究（如果有相关的 PD 测量和临床免疫原性评估）。在某些情况下，这些研究的结果可以提供足够的临床数据支持拟议的生物仿制药产品和参比制剂之间没有临床意义上的差异。然而，如果进行这些研究之后，生物类似性有其余的不确定性，需要额外的比较性临床研究进一步评估两种产品之间是否有临床意义上的差异。

　　人体药理学数据

　　蛋白质产品的人体 PK 和 PD 通常不能够从功能性试验和 / 或动物研究中被预测。因此，比较拟议产品和参比制剂的人体 PK 和 PD研究通常作为支持生物类似性证明的基础。PK 和 PD 研究（有相关的 PD 测量）通常将确立生物类似性，除非申请人可以科学地判断不需要这样的研究。即使相关的 PD 测量无法获得，也应评估敏感的 PD 终点，这样的评估可以帮助减少生物类似性的其余不确定性。

　　申请人应对人体 PK 和 PD 研究人群（即患者和健康受试者）和参数提供科学的判断，考虑研究人群和参数的相关性和敏感性。参比制剂许可的人群和参数研究应考虑参比制剂人体 PK 和 PD同一对象和不同对象变化性。例如，比较性的人体 PK 和 PD 研究应当足够敏感的人群、剂量和给药途径。FDA 建议在可能的程度上，申请人选择 PD 测量 ：①与临床结果相关（例如，MOA的机械通道或与有效性或安全性相关的疾病过程）；②在给药后，在充足的时间，用适当的精度确定剂量完整 PD 反应 ；③检测拟议产品和参比制剂之间临床意义上差异的敏感性。使用评估不同活动领域的多个 PD 措施也是有价值的。

　　当存在剂量 - 反应或全身的暴露 - 反应关系（PD 测量或临床终点的反应）。选择拟议产品的剂量 - 反应曲线的上升部分研究剂量是重要的。剂量 - 反应曲线的稳定部分的研究剂量不可能观察到两种产品之间临床意义上的差异。申请人在证实生物类似性的申请中，应当重新定义和证明 PK 和 PD 参数的标准。

　　拟议产品和参比制剂相似性（例如，随时间变化的血清浓度）的人体 PK 研究可以提供支持生物类似性证明。人体 PK 研究对临床安全性和有效性相关的研究有帮助。证实与有效性或特定安全性顾虑相关的 PD 测量的相似影响的人体 PD 研究（除了单独评估的免疫原性）更强有力地支持生物类似性。

　　在某些情况下，确立一个相似的临床 PK、PD 和免疫原性情况可以提供充分的临床数据证明两种产品之间没有临床意义上的差异。PK 和 PD 参数通常比临床效能终点在评估两种产品的相似性时更敏感。例如，对促甲状腺素（TSH）水平的影响程度将提供两种甲状腺产品比甲状腺功能正常的临床症状影响更敏感的。

　　在 PK 和 PD 结果和临床有效性之间有相关性的情况下，有效的、令人信服的 PK 和 PD 研究结果可证明药效研究是不必要的。例如，拟议产品和参比制剂在相关 PD 测量的相似剂量 - 反应曲线，结合人体 PK 情况和临床免疫原性情况，可以提供充分的证据支持非临床意义上的差异的结论。基于 PK 和 PD 的结果，仍然有生物类似性的其余不确定性。建立相似的人体 PK 和 PD 分布可以为后续临床测试选择具有针对性方法提供科学的基础。

　　对于半衰期短的产品的 PD 研究（如少于 5 日），快速的 PD 反应以及免疫原性的低发病率、交叉设计是合适的。对于半衰期长的产品（如超过 5 日），通常需要设计平行试验。申请人应当提供一个科学的理由选择研究剂量（如一个剂量或多个计量）和给药途径。

　　FDA 建议申请人考虑改变 PD 测量的持续时间以及非线性 PK 的可能性。FDA 也鼓励模拟设计比较性的人体 PK 和 PD 研究。

　　临床免疫原性评估

　　临床免疫原性评估的目标是评估拟议产品和参比制剂在人体免疫应答的发生率和严重性之间的潜在差异。例如，通过减少过敏反应，促进中和抗体的开发以及内源性蛋白质对应物以改变 PK，免疫应答可能影响产品的安全性和有效性。因此，确立拟议产品和参比制剂之间免疫应答在临床意义上没有差异，对于证明生物类似性是一个关键要素。结构化、功能化和动物数据通常不足以预测人体的免疫原性。因此，当局希望至少有一个临床研究包括拟议产品和参比制剂免疫原性的比较。FDA 鼓励申请人收集任何关于临床研究的免疫原性数据，包括人体 PK 或 PD 研究。

　　临床免疫原性评估的程度和时间将取决于一系列因素，包括分析拟议产品和参比制剂之间的相似性，以及参比制剂免疫应答的发生率和临床结果。例如，如果临床结果是严重的（例如，当参比制剂是内源性治疗性对应物，蛋白质是关键的，非冗余的生物作用或已知的过敏性反应），将可能需要更广泛的免疫原性评估证明生物类似性。如果参比制剂的免疫应答是罕见的，上市前评估两种产品之间免疫应答的明显差异足以支持生物类似性。此外，在某些情况下，安全性风险评估可能需要通过上市后监测或研究。

　　全面的免疫原性评估应考虑免疫应答的本质（例如，过敏性反应、中和抗体）、临床相关性和严重性（例如，救命治疗丧失疗效和其他不良反应），以及免疫应答发生率和正在研究的群体。FDA建议在首次治疗患者时，使用比较性平行设计（即正面研究），以评估免疫原性风险的潜在差异。然而，这取决于参比制剂和拟议产品的临床经验（考虑使用条件和患者人群），申请人可能需要评估患者提供的实质性描述，评估参比制剂和拟议生物仿制药的单独正交是否导致过敏症，免疫原性或其他反应方面的主要风险。任何评估免疫原性和免疫应答的发生率和其他参数差异的研究设计，应当在研究开始之前与 FDA 讨论。拟议产品和参比制剂之间免疫应答的差异及没有观察到的临床后遗症，可以授权进一步的评估（例如，长时间的随访评估）。

　　用于比较免疫原性的研究人群应由申请人证明其合理性，并由当局同意。如果申请人正在一个使用条件至其他使用条件下寻求推断免疫原性的发现，申请人应考虑使用足够灵敏地研究人群和治疗方案，预测拟议产品和参比制剂使用条件之间免疫应答的差异。这通常将成为出现免疫应答的不良结果的参比制剂的研究人群和治疗方案的开发。（例如，免疫抑制剂背景的患者与非免疫抑制的患者相比，更不大可能发生免疫应答）。

　　治疗性蛋白质产品（例如，抗体构造和细胞因子含量）免疫应答相关的临床免疫原点及 PD 测量的选择，应考虑使用参比制剂期间出现的免疫原性问题。申请人应预先定义临床免疫应答标准（例如，重大临床事件的定义、过敏反应），使用既定标准，每种类型的潜在免疫应答在研究之前应与 FDA 的这些标准一致。

　　后续评估的持续时间应依据 ：①免疫应答产生的时间进程（比如中和抗体，细胞介导的免疫应答的发展），和预期的临床后遗症（根据参比制剂的使用经验）；②免疫应答消失的时间进程，停止治疗的临床后遗症 ；③产品给药的时间长度，例如，对于慢性给药的试剂，建议后续期为 1 年，除非生物类似性的证据可以科学证明更短的持续时间。

　　作为一个科学问题，申请人应在临床免疫原性评估中评估以下抗体参数 ：

　　●效价，特性，相关的同型分布，发展的时间进程、持续、消失，对 PK 的影响，以及与临床后遗症的关联 ；

　　●产品活性的中和 ：中和所有相关作用的能力（例如，转运和催化活性、替代酶的中和治疗法）。

　　申请人应该开发能够灵敏检测免疫应答反应的方法，即使当存在循环药物时（拟议产品和参比制剂）。如可能的话，应该使用相同患者的血清进行拟议产品和参比制剂的测定。FDA 建议应在早期开发、验证免疫原性试验，验证应考虑拟议产品和参比制剂。申请人应在任何临床免疫原性评估之前向 FDA 咨询试验的充分性。

　　比较性临床研究

　　作为一个科学问题，比较临床研究依据结构化和功能化特征，动物检测、人体 PK 和 PD 数据和临床免疫原性评估，证明拟议产品和参比制剂之间的生物类似性是否存在临床意义上差异的不确定性的生物类似性。如果认为不需要比较性的临床研究，申请人应当提供科学的证明。

　　以下是可能影响比较性临床研究数据类型和程度的因素 ：

　　●参比制剂的性质和复杂性，结构化和功能化特征的广泛性，比较性结构化，功能化和非临床检测的结果和局限性，包括观察到的差异程度。

　　●结构、功能、非临床药理学和毒理学预测临床结果的差异，结合对参比制剂的 MOA 和疾病病理的理解程度。

　　●人体 PK 和 PD 预测临床结果的程度（例如，已知的 PD 测量与有效性或安全性相关）。

　　●参比制剂及其临床经验和治疗的程度，包括安全性和风险 -效益情况（例如，是否有潜在的靶外不良事件），适当的安全性和有效性终点和生物标记物（例如，确立的有效性，敏感的临床终点）。

　　●拟议产品的任何其他临床经验程度（例如，如果拟议产品在美国以外的地方上市）。申请人应提供科学的证明，说明他打算如何使用这些因素确定需要什么类型的临床研究，以及任何必要研究的设计。例如，如果需要比较性临床研究，申请人应解释在设计研究时是如何考虑这些因素的。包括终点、群体、相似度比较方法和统计学分析。

　　此外，有关参比制剂特定的安全性或有效性问题及其类别（包括生产或来源相关的不良事件史）将保证更多的比较性临床数据。或者，有其他生物制品信息可以支持生物类似性的决定（有上市历史文件证实临床安全性和有效性情况没有明显差异），这些信息可能是支持临床项目的选择性和针对性的额外因素。

　　终点

　　在比较临床研究中，申请人应使用可以评估拟议产品和参比制剂之间临床意义上的差异的终点。如果有科学支持，终点可能不同于参比制剂临床研究中的初级终点。如某些终点（比如 PD 测量）比临床终点更敏感，因此，可以使相关的治疗性影响比较更精确。比较性临床研究中的多种 PD 测量将增加研究的敏感度。终点的充分性取决于 PD 测量与临床结果的相关程度，结构化和功能化数据支持生物类似性的程度，MOA的理解，以及受影响结果的本质或严重性。

　　研究人群

　　研究人群的选择应基于拟议产品和参比制剂之间临床意义上差异的评估。研究人群将有与许可的参比制剂相同适应证一致的特征。然而，有研究人群不同于支持参比制剂许可的临床研究的情况。例如，如果许可的参比制剂基因预测开始，可能使用有反应标记物的患者作为研究人群。

　　样本规模和研究持续时间

　　比较性临床研究的样本规模和持续时间应当足以满足两种产品之间临床意义上差异的检测。如某些终点，比如 PD 测量，可能比临床终点更敏感，并促进小型研究的有限持续时间。在这样的情况下，比较性临床研究的规模和持续时间可能不足以检测相关的安全性信号，可能需要单独安全性和免疫原性的评估。

　　研究设计和分析

　　生物仿制品发展项目的比较性临床研究应基于调查拟议产品和参比制剂之间是否有临床意义上的差异设计。设计应考虑生物类似性其余不确定性的性质和程度、比较性结构化和功能化特征、动物检测、人体 PK 和 PD 研究以及临床免疫原性评估产生的数据。

　　FDA 通常希望临床研究设计用于确立统计学证据，拟议产品即不超过参比产品的具体界限也不低于参比产品的具体界限。通常情况下，具有对称的劣性和优越性的界限的等价设计将被使用。对称界限是合理的，例如，存在剂量毒性反应。

　　在某些情况下，使用较大的非对称时间间隔上限来排除优越的比用下限排除劣势更适宜。不对称的时间间隔可能是合理的，例如，如果在临床研究中使用的剂量接近剂量 - 反应曲线的平稳段，并且几乎没有剂量相关效应的可能性（例如毒性）。在大多数情况下，使用一个不对称的间隔通常比对称的界限所需要的样本量小。但是，如果有表现出明显优越性，然后应进一步考虑生物仿制品是否与参比制剂具有生物相似性。

　　在某些情况下，根据研究人群和终点，排除唯一的劣势可能足以证明拟议产品和参比制剂之间无临床意义上的差异。例如，如果参比制剂在临床剂量水平上的药代动力学靶点剂量已经公认饱和，使用低于已经批准的临床剂量是不合理的，非劣效设计可能就足够了。

　　申请人应该为参比制剂研究设计、研究人群、研究终点，参比制剂的估计效应和保证金（要排除多少差额）的选择提供足够的科学依据。申请人应该在启动临床比较性研究之前与 FDA 讨论他们的研究方案和全面的临床开发计划。

　　适应证临床数据的推断

　　如果拟议产品符合 PHS 法案第 351（k）节下生物仿制品许可的法规要求，除了其他之外，来源于临床研究的数据足以证明适当条件下使用的安全性，纯度和效能，申请人可以参照参比制剂的许可，寻求一个或多个额外拟议产品的使用条件。然而，申请人需要提供足够的科学临床数据，以证明每个使用条件下的生物类似性。

　　这种科学推断应证明，例如，使用测试和推断条件的问题如下。

　　●寻求许可的每个使用条件中的 MOA ；这可以包括 ：

　　—产品的每种相关活性 / 功能的目标 / 受试者 ；

　　—结合，剂量 / 浓度反应，靶 / 受体结合后，分子信号的传导模式；

　　—产品结构和目标 / 受试者相互作用之间的关系 ；

　　—目标 / 受试者的位置和表达 ；

　　●不同患者人群中产品的 PK 和生物分布（相关的 PD 测量也会提供 MOA 重要的信息）。

　　●不同患者人群中的产品免疫原性。

　　●每个使用条件和患者群体预期毒理学的差异（包括是否有预期的毒性，与产品药理学活性相关或脱靶活动）。

　　●每个许可的使用条件患者人群，任何可能影响产品安全性或效能的因素。

　　上述有关使用条件之间差异的因素没有必要通过推断排除。需要科学完整的证据解决这些差异，证明生物类似性。

　　在选择研究使用条件时，允许临床数据后续推断其他使用条件，FDA 建议申请人考虑选择对临床监测足够敏感的使用条件，以便灵敏地检测两种产品之间临床意义上的差异。

　　拟议产品的申请人可以获得参比制剂已批准许可的使用条件。如果参比制剂的使用条件在 FD&C A 法案和 21 CFR 601E 部分（加速审评）下许可，这种使用条件尚未在上市后研究中得到验证，拟议产品的申请人应考虑研究经许可的其他使用条件，如果上市后研究没有验证使用条件下参比制剂的临床效益，应避免潜在的并发症。

上市后安全性监测注意事项

　　有力的上市后安全性监测是确保生物制品安全性和有效性的重要措施，包括生物仿制治疗性蛋白质产品。

　　上市后安全性监测应首先考虑与参比制剂的使用和类型相关的安全性和功效、拟议产品的发展和临床用途（如果在美国之外上市）、特殊使用条件和患者人群，以及在生物仿制药开发项目中患者的暴露。拟议产品的上市后安全性监测应有充分的机制来区分与之相关拟议产品和参比制剂的不良事件，包括之前与参比制剂无关而与拟议产品相关的不良事件、在批准前的临床检测前也许不能观察到罕见而严重的安全性风险（如免疫原性）以及因为使用的人群规模可能不足以评估罕见的事件。在特殊情况下，这种风险可能需要通过上市后监测或研究进行评估。此外，关于其他生物制品，FDA 可以采取适当的措施确保拟议产品的安全性和有效性，包括需要上市后研究或临床试验评估某些安全风险。

　　由于上市后安全性监测的一些方面是产品特定的，FDA 鼓励申请人咨询相关 FDA 部门，讨论申请人提出的上市后安全性监测方法。

咨询 FDA

　　许多产品特定的因素可以影响产品开发项目的成分，旨在确立与参比制剂生物类似的拟议产品。因此，FDA 通常根据具体情况开展拟议产品项目，提供案例间的反馈。此外，可能不能识别拖动开发项目的所有必要成分 ；在某个步骤评估一种元素（例如，结构化分析）会影响下一步后续数据的类型和数量的决定。基于这些理由，FDA 建议申请人使用逐步的方法确立支持生物类似性的全部证据。

　　FDA 也建议申请人按照 FDA 的要求提供生物仿制品的开发计划并确立里程碑式时间表，作为未来与当局讨论的里程碑。FDA 期望申请人与之提前讨论有关产品开发计划并提供适当的科学证明的方法将促进生物仿制药的开发。【摘编自《FDA药品与生物制品管理办法指南（一）》，中国医药科技出版社】

本文仅代表作者观点，不代表本站立场。

(责任编辑：李硕)